Σε ένα άρθρο ανασκόπησης των Popov et al. από το 2019, η ηλεκτρονική μικροσκοπία (ΗΜ) περιγράφεται ως μία από τις σημαντικότερες και πιο ευρέως χρησιμοποιούμενες μεθόδους για την ταυτοποίηση και τον χαρακτηρισμό νέων ιών. Ωστόσο, η αξιολόγηση αυτή απαιτεί διαφοροποιημένη εξέταση, ιδίως όσον αφορά την εξειδίκευση των δομικών ευρημάτων.
Ακολουθούν δύο μικρογραφίες ηλεκτρονίων από αυτό το άρθρο επισκόπησης.
Σχήμα Γ:
Συσσώρευση ιόντων του ιού Fako (διάμετρος περίπου 45 nm) σε μολυσμένο κύτταρο C6/36.
Σχήμα Δ:
Ιοί (διάμετρος περίπου 45 nm) του bannavirus (στέλεχος JKT-6423), γένος Seadornavirus, υποοικογένεια Sedoreovirinae, στο κυτταρόπλασμα ενός μολυσμένου C6/36 κυττάρου. Οι αιχμές βέλους επισημαίνουν τμήμα του πυρήνα του κυττάρου. Κλίμακα = 100 nm.
Ανεξάρτητοι επιστήμονες από το πρόγραμμα Virology Controls Studies Project παρείχαν στο NEXT LEVEL εικόνες από ηλεκτρονικό μικροσκόπιο κυτταρικών καλλιεργειών Vero-E6 για να διερευνήσουν τον βαθμό στον οποίο η ίδια η πειραματική διάταξη προκαλεί δομικές αλλαγές στα κύτταρα. Οι εικόνες που ελήφθησαν με αυτόν τον τρόπο επρόκειτο επίσης να χρησιμοποιηθούν για αναλύσεις εικόνων και σύνολα δεδομένων εκπαίδευσης που υποστηρίζονται από AI. Το πείραμα περιελάμβανε μια προπαρασκευαστική φάση κατά την οποία τα κύτταρα αποψύχονται και περνούν αρκετές φορές μέχρι να επιτευχθεί μια σταθερή και μορφολογικά μη αξιοσημείωτη κατάσταση. Ακολούθησαν δύο πειραματικές φάσεις που διέφεραν μόνο ως προς τη συγκέντρωση εμβρυϊκού ορού βοοειδών (FBS) στο μέσο καλλιέργειας.
Η ακόλουθη φωτογραφία ηλεκτρονικού μικροσκοπίου προέρχεται από καλλιέργεια κυττάρων Vero E6 που υποβλήθηκε σε επεξεργασία επί πέντε ημέρες με μέσο ανάπτυξης που περιέχει 10 % FBS.
Ανεξάρτητα από τις διαφορές μεταξύ των κυτταρικών σειρών που χρησιμοποιήθηκαν (κύτταρα C6/36 έναντι κυττάρων Vero-E6) και τις πιθανές αποκλίσεις στο μέγεθος των παρατηρούμενων δομών, στις ηλεκτρονικές μικρογραφίες μπορούν να αναγνωριστούν μορφολογικά συγκρίσιμα σφαιρικά σωματίδια. Πρέπει να τονιστεί ότι στις καλλιέργειες κυττάρων Vero-E6 δεν προστέθηκε ποτέ “ιικό υλικό”. Συνεπώς, οι παρατηρούμενες σφαιρικές δομές είναι προφανώς αποκλειστικά αποτέλεσμα της πειραματικής διάταξης και των συνθηκών καλλιέργειας των κυττάρων. Το πείραμα με τα κύτταρα Vero-E6 αποτελεί έτσι ένα κλασικό και απαραίτητο πείραμα αρνητικού ελέγχου στην ιολογική έρευνα. Δείχνει ότι οι δομές που μοιάζουν με ιό και είναι ορατές στο ηλεκτρονικό μικροσκόπιο δεν μπορούν να ερμηνευθούν από μόνες τους ως απόδειξη για την παρουσία ενός ιού, αλλά πρέπει πάντα να αξιολογούνται στο πλαίσιο κατάλληλων ελέγχων.
Τέτοια πειράματα ελέγχου δεν διεξάγονται και δεν τεκμηριώνονται με συνέπεια στις ιολογικές μελέτες ή δεν είναι επαρκώς συστηματικά. Κατά συνέπεια, υπάρχει κίνδυνος να παρερμηνευθούν τα μορφολογικά ευρήματα από την ηλεκτρονική μικροσκοπία και να ερμηνευθούν λανθασμένα ως σωματίδια του ιού δομικά τεχνουργήματα ή εγγενείς κυτταρικές δομές.
Συμπέρασμα: Οδηγούν τα ευρήματα αυτά σε αμφισβήτηση προηγούμενων συμπερασμάτων στην ιολογία;
Περισσότερες πληροφορίες σχετικά με αυτό και άλλα θέματα μπορείτε να βρείτε στην επιστημονική πλατφόρμα NEXT LEVEL – Wissen neu gedacht.
