Num artigo de revisão de Popov et al. de 2019, a microscopia eletrónica (ME) é descrita como um dos métodos mais importantes e mais amplamente utilizados para identificar e caraterizar novos vírus. No entanto, esta avaliação requer uma consideração diferenciada, nomeadamente no que diz respeito à especificidade dos resultados estruturais.
Abaixo estão duas micrografias electrónicas deste artigo de síntese.
Figura C:
Acumulação de viriões do vírus Fako (diâmetro de cerca de 45 nm) numa célula C6/36 infetada.
Figura D:
Viriões (diâmetro de cerca de 45 nm) do bannavírus (estirpe JKT-6423), género Seadornavirus, subfamília Sedoreovirinae, no citoplasma de uma célula C6/36 infetada. As setas marcam uma secção do núcleo da célula. Escala = 100 nm.
Cientistas independentes do Projeto de Estudos de Controlos de Virologia forneceram à NEXT LEVEL imagens de microscópio eletrónico de culturas de células Vero-E6 para investigar até que ponto a própria configuração experimental causa alterações estruturais nas células. As imagens obtidas desta forma deveriam também ser utilizadas para análises de imagens apoiadas por IA e conjuntos de dados de treino. A experiência incluiu uma fase preparatória em que as células foram descongeladas e passadas várias vezes até se atingir um estado estável e morfologicamente normal. Seguiram-se duas fases experimentais que diferiam apenas na concentração de soro fetal bovino (FBS) no meio de cultura.
A seguinte micrografia eletrónica é de uma cultura de células Vero E6 tratadas durante cinco dias com um meio de crescimento contendo 10 % de FBS.
Independentemente das diferenças entre as linhas celulares utilizadas (células C6/36 versus células Vero-E6) e de possíveis desvios na dimensão das estruturas observadas, podem ser reconhecidas nas micrografias electrónicas partículas esféricas morfologicamente comparáveis. É de salientar que em nenhum momento foi adicionado “material viral” às culturas de células Vero-E6. As estruturas esféricas observadas são, portanto, aparentemente apenas o resultado da montagem experimental e das condições de cultura das células. A experiência com células Vero-E6 representa, assim, uma experiência clássica e essencial de controlo negativo na investigação virológica. Ilustra que as estruturas semelhantes a vírus visíveis ao microscópio eletrónico não podem ser interpretadas per se como prova da presença de um vírus, mas devem ser sempre avaliadas no contexto de controlos adequados.
Estas experiências de controlo não são realizadas e documentadas de forma consistente nos estudos virológicos, ou não o são de forma suficientemente sistemática. Consequentemente, existe o risco de os resultados morfológicos da microscopia eletrónica serem mal interpretados e de artefactos estruturais ou estruturas celulares intrínsecas serem erradamente interpretados como partículas de vírus.
Conclusão: Estes resultados conduzem a um questionamento das conclusões anteriores em virologia?
Mais informações sobre este e outros temas podem ser encontradas na plataforma científica NEXT LEVEL – Wissen neu gedacht.
