Într-un articol de recenzie al lui Popov și colab. din 2019, microscopia electronică (ME) este descrisă ca una dintre cele mai importante și mai utilizate metode pentru identificarea și caracterizarea noilor virusuri. Cu toate acestea, această evaluare necesită o considerare diferențiată, în special în ceea ce privește specificitatea constatărilor structurale.
Mai jos sunt prezentate două micrografii electronice din acest articol de prezentare generală.
Figura C:
Acumularea de virioni ai virusului Fako (diametru de aproximativ 45 nm) într-o celulă C6/36 infectată.
Figura D:
Virioni (diametru aprox. 45 nm) ai bannavirusului (tulpina JKT-6423), genul Seadornavirus, subfamilia Sedoreovirinae, în citoplasma unei celule C6/36 infectate. Vârfurile de săgeată marchează o secțiune a nucleului celular. Scară = 100 nm.
Oameni de știință independenți din cadrul Proiectului de studii privind controalele virusologice au pus la dispoziția NEXT LEVEL imagini de microscop electronic ale culturilor de celule Vero-E6 pentru a investiga măsura în care configurația experimentală în sine provoacă modificări structurale în celule. Imaginile obținute în acest mod urmau să fie utilizate, de asemenea, pentru analize de imagini și seturi de date de formare susținute de AI. Experimentul a cuprins o fază pregătitoare în care celulele au fost decongelate și pasate de mai multe ori până la atingerea unei stări stabile și morfologic nesemnificative. Aceasta a fost urmată de două faze experimentale care diferă doar prin concentrația de ser fetal bovin (FBS) din mediul de cultură.
Următoarea micrografie electronică provine de la o cultură de celule Vero E6 tratată timp de cinci zile cu un mediu de creștere care conține 10 % FBS.
Indiferent de diferențele dintre liniile celulare utilizate (celule C6/36 versus celule Vero-E6) și de posibilele abateri în ceea ce privește dimensiunea structurilor observate, în micrografiile electronice pot fi recunoscute particule sferice comparabile din punct de vedere morfologic. Trebuie subliniat faptul că în culturile de celule Vero-E6 nu a fost adăugat în niciun moment „material viral”. Prin urmare, se pare că structurile sferice observate sunt rezultatul exclusiv al configurației experimentale și al condițiilor de cultură celulară. Experimentul cu celule Vero-E6 reprezintă astfel un experiment clasic și esențial de control negativ în cercetarea virusologică. Acesta ilustrează faptul că structurile virale vizibile la microscopul electronic nu pot fi interpretate per se ca dovezi ale prezenței unui virus, ci trebuie întotdeauna evaluate în contextul unor controale adecvate.
Astfel de experimente de control nu sunt efectuate și documentate în mod constant în studiile virusologice sau nu într-o formă suficient de sistematică. În consecință, există riscul ca rezultatele morfologice ale microscopiei electronice să fie interpretate greșit, iar artefactele structurale sau structurile celulare intrinseci să fie interpretate greșit ca particule de virus.
Concluzii: Aceste descoperiri conduc la o punere sub semnul întrebării a concluziilor anterioare în virusologie?
Informații suplimentare despre acest subiect și altele pot fi găsite pe platforma științifică NEXT LEVEL – Wissen neu gedacht.
