¿Artefactos en lugar de patógenos? Examen crítico de los hallazgos del microscopio electrónico

¿Artefactos en lugar de patógenos? Examen crítico de los hallazgos del microscopio electrónico- 2

En un artículo de revisión de Popov et al. de 2019, la microscopía electrónica (ME) se describe como uno de los métodos más importantes y más utilizados para identificar y caracterizar nuevos virus. Sin embargo, esta evaluación requiere una consideración diferenciada, en particular con respecto a la especificidad de los hallazgos estructurales.

A continuación se muestran dos micrografías electrónicas de este artículo general.

Figura C:
Acumulación de viriones del virus Fako (diámetro aprox. 45 nm) en una célula C6/36 infectada.

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Figura D:
Viriones (diámetro aprox. 45 nm) del bannavirus (cepa JKT-6423), género Seadornavirus, subfamilia Sedoreovirinae, en el citoplasma de una célula C6/36 infectada. Las puntas de flecha marcan una sección del núcleo celular. Escala = 100 nm.

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Científicos independientes del Proyecto de Estudios de Controles Virológicos proporcionaron a NEXT LEVEL imágenes de microscopio electrónico de cultivos de células Vero-E6 para investigar hasta qué punto la propia configuración experimental causa cambios estructurales en las células. Las imágenes obtenidas de esta manera también iban a ser utilizadas para análisis de imagen soportados por IA y conjuntos de datos de entrenamiento. El experimento comprendía una fase preparatoria en la que las células se descongelaban y se pasaban varias veces hasta alcanzar un estado estable y morfológicamente anodino. A continuación se llevaron a cabo dos fases experimentales que sólo diferían en la concentración de suero fetal bovino (FBS) en el medio de cultivo.

La siguiente micrografía electrónica procede de un cultivo de células Vero E6 tratadas durante cinco días con un medio de crecimiento que contiene un 10 % de FBS.

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Independientemente de las diferencias entre las líneas celulares utilizadas (células C6/36 frente a células Vero-E6) y de las posibles desviaciones en el tamaño de las estructuras observadas, en las micrografías electrónicas pueden reconocerse partículas esféricas morfológicamente comparables. Cabe destacar que en ningún momento se añadió «material vírico» a los cultivos de células Vero-E6. Por tanto, las estructuras esféricas observadas parecen ser únicamente el resultado del montaje experimental y de las condiciones de cultivo celular. El experimento con células Vero-E6 representa, por tanto, un experimento de control negativo clásico y esencial en la investigación virológica. Ilustra que las estructuras similares a virus visibles al microscopio electrónico no pueden interpretarse per se como prueba de la presencia de un virus, sino que deben evaluarse siempre en el contexto de controles adecuados.

Estos experimentos de control no se llevan a cabo ni se documentan sistemáticamente en los estudios virológicos, o no de forma suficientemente sistemática. En consecuencia, existe el riesgo de que los resultados morfológicos de la microscopía electrónica se interpreten erróneamente y que los artefactos estructurales o las estructuras celulares intrínsecas se interpreten erróneamente como partículas de virus.

Conclusiones: ¿Llevan estos resultados a cuestionar conclusiones anteriores en virología?

Encontrará más información sobre este y otros temas en la plataforma científica NEXT LEVEL – Wissen neu gedacht.

Fotografía

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